配制培養(yǎng)基時(shí)，葡萄糖和谷氨酰氨的使用

    葡萄糖在生物學(xué)領(lǐng)域具有重要地位，是活細(xì)胞的能量來(lái)源和新陳代謝中間產(chǎn)物，為生物的主要供能物質(zhì)，所以在培養(yǎng)細(xì)胞中，一般的細(xì)胞都會(huì)選擇高糖的培養(yǎng)基來(lái)促進(jìn)細(xì)胞體外生長(zhǎng)。

    在目前常用的培養(yǎng)基中，葡萄糖和谷胺酰胺是體外培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞的主要能源，其能量代謝通路與體內(nèi)完-全不同，表現(xiàn)為葡萄糖主要經(jīng)糖酵解途徑為細(xì)胞提供能量，谷胺酰胺大部分通過(guò)不完-全氧化途徑，另一小部分通過(guò)完-全氧化為細(xì)胞供能。因此，他們能調(diào)整細(xì)胞內(nèi)的代謝途徑，促進(jìn)細(xì)胞的快速生長(zhǎng)和產(chǎn)物合成，同時(shí)可減少代謝抑制物的生成。

    L-谷氨酰胺在溶液中經(jīng)過(guò)一段時(shí)間后會(huì)降解，它的降解導(dǎo)致氨的形成，而氨對(duì)于一些細(xì)胞具有毒性GlutaMAX-I 二肽是一個(gè)L-谷氨酰胺的衍生物，其不穩(wěn)定的alpha-氨基用L-丙氨酸來(lái)保護(hù)。一種肽酶逐漸裂解二肽，釋放L-谷氨酰胺供利用。GlutaMAX-I二肽非常穩(wěn)定，即使在121磅滅菌20分鐘，GlutaMAX-I 二肽溶液有最小的降解，如果在相同條件下，L-谷氨酰胺幾乎完-全降解。

    葡萄糖主要通過(guò)糖酵解和檸檬酸循環(huán)兩個(gè)酶系結(jié)構(gòu)共同分解葡萄糖提供生理活動(dòng)所需要的能量和細(xì)胞結(jié)構(gòu)組成的小分子，并且能夠在組織細(xì)胞內(nèi)起到維持滲透壓的作用，如果葡萄糖過(guò)多，那么會(huì)通過(guò)不同過(guò)程變成脂肪或蛋白質(zhì)。

葡萄糖和L-谷氨酰胺在培養(yǎng)基中濃度

    谷氨酰胺在細(xì)胞代謝過(guò)程中起重要作用，合成培養(yǎng)基中都要添加，由于谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定容易降解，4℃下放置7天即可分解約50%，所以都是在使用前添加。配制好的培養(yǎng)液（含谷氨酰胺）在4℃放置2周以上時(shí)，要重新加入原來(lái)量的谷氨酰胺，故需單獨(dú)配制谷氨酰胺，以便臨時(shí)加入培養(yǎng)液內(nèi)。谷氨酰胺使用終濃度為0.002mol/L。一般配制為100倍濃縮液，即濃度為200mmol/L（29.22g/L），配制時(shí)應(yīng)加溫30℃，完-全溶解后過(guò)濾除菌，分裝至小瓶，儲(chǔ)存于－20℃。使用時(shí)，在每100ml培養(yǎng)液中加入0.5~2ml谷氨酰胺濃縮液，終濃度為1~4mmol/L即可。

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