染料排斥法測定細胞生存力實驗

材料與儀器

胰蛋白酶
巴斯德吸管 顯微鏡 手執(zhí)計數(shù)器 生存力染料 血細胞計數(shù)板

步驟

材料

無菌

受試細胞，如胰蛋白酶消化的貼壁細胞、融化冷凍的細胞或原代離散的細胞
合適的生長液 20ml
0.25% 胰蛋白酶 5ml
D-PBSA10ml

非滅菌

血細胞計數(shù)板
生存力染料 1ml (如用D-PBSA 或HBSS 配制的 0.4% 臺盼藍或 1% 萘黑）
巴斯德吸管
顯微鏡
手執(zhí)計數(shù)器

操作步驟

1. 用胰蛋白酶消化或離心與重懸，制備高濃度的細胞懸液（約1X106 個/ml)。

2. 取一塊干凈的血細胞計數(shù)板，將蓋玻片間定在適當位置上。

3 . 將一滴細胞懸液和一滴（臺盼藍）或四滴（萘黑）染料混勻。

4 . 加至血細胞計數(shù)板的計數(shù)室中。

5 . 靜置1～2min (但不要放置很久，否則活細胞會受到損傷而吸收染料）。

6 . 將計數(shù)板置于顯微鏡下，選擇10X 物鏡，利用網(wǎng)格線聚焦。
7 . 計數(shù)細胞總數(shù)以及著色細胞數(shù)。

8 .清洗血細胞計數(shù)板，放人盒內(nèi)。

以上就是本期的內(nèi)容，更多資訊，歡迎點擊安培生物網(wǎng)站鏈接了解更多技術(shù)與產(chǎn)品資訊。

安培生物科技有限公司介紹：

安培生物堅持為生命科學研究、活體動物轉(zhuǎn)染、大規(guī)模生物生產(chǎn)、基因和細胞治療領域客戶，提供*細胞體內(nèi)可代謝的核酸轉(zhuǎn)染試劑；inviCELL™Platelet lysate無動物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細胞擴增和生產(chǎn)，包括培養(yǎng)間充質(zhì)干細胞和多種免疫細胞系等，為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無血清細胞培養(yǎng)規(guī)模生產(chǎn)服務；提供以植物生物為平臺基因序列全人源化、*的細胞培養(yǎng)可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品；提供內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL、對細胞無毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品。安培生物專注為生物醫(yī)藥領域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務，努力發(fā)展為基因治療、細胞治療的生物科技企業(yè)